蛋白质免疫印迹法 (Western Blot )
整膜,检测组织或者细胞内某种或者某些特异性蛋白质的表达
服务介绍
蛋白质免疫印迹法 (Western Blot ) ,简称WB ,是指通过SDS-PAGE胶将不同分子量的蛋白质分离开,然后将目标蛋白转移到载体(PVDF)膜上,利用抗原抗体的特异性结合,用特异性的一抗结合目标蛋白,用HRP标记的二抗结合一抗,再加以ECL发光液显色,检测组织或者细胞内某种或者某些特异性蛋白质的表达。蛋白质免疫印迹是做蛋白质分析的一种常规技术,常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析,还可以用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用后续分析。
实验流程:
蛋白提取
制胶
电泳
转膜
封闭
抗孵育
二抗孵育
化学发光
结果分析
客户提供
需检测的样品(培养上清、血清、血浆等),需-20℃保存,避免反复冻融;
抗原(抗原鉴定需提供),需提供足量抗原,对抗原的纯度及质量要求将依据实验要求进行商讨后决定;
抗体(抗体鉴定需提供),需提供足量一抗(或由金开瑞代为购买),同时请提供商业抗体的详细说明书,便于我们按照说明书要求精确实验;
其他信息,包括:1、标本编号;2、所测项目;3、是否做复孔; 4、实验后标本是否寄回; 您无需提供二抗,为了保证试验顺利准确,您所提供的抗体、抗原信息务必准确详细,我们的工作人员会按照ELISA标准的SOP流程操作。
送样运输要求:
新鲜组织,100mg以上,干冰运输。
细胞量为5*10^6以上,收集细胞沉淀,干冰运输。