酵母单杂交

核蛋白酵母双杂交、膜蛋白酵母双杂交

服务特色

酵母单杂交（Yeast One-Hybrid）是一种用于研究蛋白质与DNA序列之间相互作用的实验技术。它结合了酵母细胞内的转录激活和检测系统，用于筛选和鉴定与给定DNA序列相互作用的蛋白质，具有高通量筛选、生理相关性、较低的假阳性率、定量分析能力以及适用于多个研究领域的优势。

服务介绍

酵母单杂交技术是在酵母双杂基础上发展而来的一种研究核酸-蛋白相互作用的工具，被广泛用于研究真核细胞内基因的表达调控，如鉴别DNA结合位点发现潜在的结合蛋白基因、分析DNA结合结构域信息等。

服务优势

一站式辅助检测手段方便快捷，得到可靠的实验结论；

多年文库构建经验，4种优化的Total RNA提取技术方案可以有效保证Total RNA的纯度和完整性，保证样本的多样性。

直接检测蛋白质之间的相互作用，而不依赖于其他分子或细胞的参与；

可同时筛选和鉴定多个蛋白质间的相互作用，实现高通量的筛选和分析,快速获得大量相互作用信息；

采用多个筛选步骤，如报告基因的验证和双重选择，减少非特异性相互作用的误报。

客户提供

1、物种信息，样本类型

2、基因序列信息

3、实验目的

最终交付

文库菌液，文库质粒

高通量蛋白质组学分析（GO及KEGG功能注释）

原始数据及结果图片

服务说明

服务流程

酵母单杂交文库筛选：

酵母单杂交文库筛选

接收订单及样品

诱饵载体及诱饵菌株构建

自激活检测

文库筛选

阳性克隆菌株鉴定

结果交付

酵⺟杂交⽂库构建：

总RNA提取

mRNA分离及纯化

双链cDNA合成及纯化

自双链cDNA与载体融合

⼤肠⽂库菌液

⽂库质粒

酵母杂交验证：

诱饵，猎物重组质粒构建

诱饵⾃激活及毒性验证

酵⺟细胞共转验证

稀释点钟验证

其他流程

服务项目	客户提供	最终交付
文库构建	组织/细胞	滴度在1×10°cfu/mL以上的酵母文库菌液；文库PCR鉴定结果图片(阳性率在90%以上)
文库筛选	promoter基因序列/质粒	筛选过程中的全部原始图片；筛选获得所有相互作用的猎物蛋白的测序结果

针对酵母单杂交实验结果，可作进一步验证：

服务内容	实验目的	细分	周期(工作日)
EMSA	验证启动子和蛋白互作	探针合成及标记	10
		EMSA实验	20
双荧光素酶检测	验证启动子和蛋白互作	探载体构建	10-15
		双荧光素酶检测	25